30/11/2025
🧪 Fiche Technique – Test VDRL-Charbon
1. Objectif
- Dépistage de la syphilis ( _Treponema pallidum_)
- Suivi sérologique et évaluation de la réponse au traitement
2. Principe
- Test non tréponémique: détection d’anticorps anti-cardiolipine
- Réaction de microagglutination sur lame, observée au microscope
- Antigène: microcristaux de cholestérol + cardiolipide + phosphatidyl-glycérol
- Lecture facilitée par des particules de charbon couplées à des billes de latex
3. Échantillons
- Sérum ou LCR, prélevés à jeun (8h)
- Éviter les échantillons hémolysés, lipémiques, contaminés ou coagulés
- Séparation du sérum dans les 4h
- Conservation:
- +4°C: 1 semaine
- −20°C: plusieurs mois
4. Matériel
- Centrifugeuse
- Microscope optique binoculaire (objectif x10)
- Bain-marie
- Micropipettes (5–50 µl) + embouts
- Tubes à hémolyse + portoir
- Plaques Kline
- Agitateur rotatif Kline
- Conteneur de déchets contaminés
- Eau de Javel à 5%
5. Réactifs
- Coffrets commerciaux (suivre le protocole du fabricant)
- Flacon de charbon antigène
- Solution NaCl 0,9% préparée au laboratoire
- Conservation à +4°C
*Remarques:*
- Ne pas mélanger des lots différents
- Ne pas utiliser de réactifs périmés
- Équilibrer à température ambiante avant usage
- Conservation des trousses entre +2°C et +8°C
6. Mode opératoire
1. Température ambiante des réactifs et échantillons (10–20 min)
2. Noter le numéro de lot et la date de péremption
3. Déposer une goutte de sérum dans chaque puits de la plaque
4. Ajouter une goutte de réactif VDRL
5. Agiter 3–5 min à 100 tours/min
6. Observer au microscope à 100x
7. Résultat:
- Positif: agglutination visible
- Négatif: pas d’agglutination
- Toujours inclure un témoin positif et négatif
7. Interprétation
a) Réaction qualitative
ObservationRésultatNotationNuage homogène sans agrégatsNégatif–Petits agrégats dispersésFaiblement positif+Amas moyens ou grosPositif+++*b) Réaction quantitative (titrage)*
- Dilutions: 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32…
- Titre = dernière dilution avec réaction positive nette
- Utilisé pour le suivi thérapeutique
8. Interprétation croisée VDRL / TPHA*
VDRL négatif
TPHA Interprétation Négatif Sujet non infecté, syphilis guérie, contamination récente (< 3 semaines)PositifSyphilis latente/débutante, cicatrice sérologique, autres tréponématoses, faux positif, prozone*VDRL positif
TPHA Interprétation Négatif Faux positif, syphilis chez sujet VIH+, immunodéprimé ou âgéPositifSyphilis évolutive, cicatrice sérologique, autres tréponématoses*9. Cas particulier: Neurosyphilis*
- Diagnostic sur LCR
- *VDRL LCR*: très spécifique (100%), peu sensible (27%) → positif = diagnostic
- *FTA-abs LCR*: très sensible (75–100%), peu spécifique (
